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组织消化液I
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组织消化液I 
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品牌: Vivacell 型号: C3501-0020
规格: 20ml
【预期用途】

用于从组织上消化原代干细胞,做后续细胞体外增值培养。培养后的细胞仅用于体外分析检测,不作为治疗使用。


【检验原理】

以特定酶自组织块分离出原代间充质干细胞是常见的细胞培养技术。组织消化液利用数种重组表达的消化酶制备而成,无动物源成分。组织消化液针对组织的细胞外基质而设计, 不含胰酶,不会伤害细胞。可以有效地消化细胞外基质,进而从组织块 (脐带、脂肪、胎盘) 分离出大量的原代间充质干细胞,作为后续细胞增殖使用。


【主要组成成分】

由 DMEM -LG 基础培养基、膠原脢、分散脢、脱氧核糖核酸酶组成。


【适用范围】

收获组织 (脐带、脂肪、胎盘)的原代间充质干细胞, 做后续细胞体外增殖培养。


【储存条件及有效期】

应贮存在-10~-20℃,有效期为1年。开封后存放4℃,注意避光,1周内使用。不建议反复冻融。


【生产日期与失效日期】

详见产品标签。


【使用方法】

以脐带组织为例

1. 将脐带用DPBS   漂洗干净,剪成1-50px大小,剔除血管。

2. 将组织块剪成3-5mm3,移入50ml离心管,再加入适量的分离液。

* 一条长度10公分的脐带建议加入10ml的分

离液;或者组织块 : 分离液(vol)= 1:1。

** 视情况而定,可自行在分离液中添加1%青

链双抗。

3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱,过夜反应(16小时)。

* 若总反应体积较大,也可持续旋转混合。

4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA终止反应后,1500 xg离心5分钟,去除上清。

* 溶液比较浓稠,小心不要影响下层的细胞; 建

议留下5ml左右的溶液。

** 没有EDTA, 可使用无钙镁DPBS取代。

5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,500 xg离心5分钟,去除上清。

6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。

7. 用适量的培养基重悬细胞后,即可按常规细胞培养方法接种P0代细胞培养。

* 消化后的原代细胞,建议培养时接种密度提高

到10,000/cm2以上;传代后即可按常规的接

种密度培养 。




以皮下脂肪组织块为例

1. 以DPBS将新鲜的皮下脂肪组织块漂洗干净,剔除明显的血管或血块。

2. 将组织块剪成3-5mm3,移入50ml离心管,再加入适量的分离液。

* 1克组织块可加入约5ml分离液。

** 视情况而定,可自行在分离液中添加1%青链双抗。

3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱,反应4小时 (用户也可自行调整反应时间)。

* 若总反应体积较大,也可使用持续旋转混合。

4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA

终止反应后,250 xg离心5分钟,去除上清。

* 没有EDTA, 也可使用无钙镁DPBS取代。

5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后,

250 xg离心5分钟,去除上清。

6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细

胞后,250 xg离心5分钟,去除上清。

7. 用适量的培养基重悬细胞,再以100目的筛网

过滤细胞液后,即可按常规细胞培养方法接种

细胞培养。

* 消化后的原代细胞,建议培养时接种密度提高

到10,000/cm2以上;传代后即可按常规的接

种密度培养。


【产品性能指标】

1.       pH值:7.0-8.0

2.       渗透压(MOSM/KG):310-345

3.       无菌检测:无菌

4.       内毒素(EU/ml):<10

5.       原代细胞分离实验:>80%


【注意事项】

1.       本品仅用于体外诊断,不用于临床治疗,严禁内服,不能用嘴吸液。

2.    试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。

3.    操作过程应避免污染。

4.    操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗。

5.    禁止使用超出规定有效期的产品。


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