Cell Signaling(CST) 8819 Active Cdc42 Detection Kit
产品编号 8819 | Cell Signaling(CST)
Cell Signaling Technology公司的细胞分析试剂盒提供了从头至尾的试剂和可行的操作步骤，从而在*少的时间内得到*精确的结果。这些充分验证的全套试剂盒可用于评估细胞生存、增殖、生存能力以及酶和激酶活性。
产品描述
Kit Includes | Quantity | Applications | Reactivity | Homology† | MW (kDa) | Isotype |
|---|
GTP γS | 50 µl | | | | | |
GDP | 50 µl | | | | | |
Glutathione Resin | 3 ml | | | | | |
Lysis/Binding/Wash Buffer | 100 ml | | | | | |
SDS Sample Buffer | 1.5 ml | | | | | |
Spin Cup and Collection Tubes | 30 ea | | | | | |
GST-Human PAK1-PBD | 600 µg | | | | | |
Cdc42 Mouse mAb | 300 µl | | | | | |
Specificity / Sensitivity
Active Cdc42 Detection Kit detects endogenous levels of GTP-bound (active) Cdc42 as shown in Figure 1. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.如图1， Active Cdc42 Detection试剂盒可以检测内源性的GTP-bound (active) Cdc42。通过内部测试，该试剂盒能够检测来自指定物种的蛋白，但也可能会检测到其他物种中的同源蛋白。
Description
The Active Cdc42 Detection Kit provides all reagents necessary for measuring activation of Cdc42 GTPase in the cell. GST-PAK1-PBD fusion protein is used to bind the activated form of GTP-bound Cdc42, which can then be immunoprecipitated with glutathione resin. Cdc42 activation levels are then determined by western blot using a Cdc42 Mouse mAb.Active Cdc42 Detection试剂盒提供了所有足以检测细胞中激活状态Cdc42 GTPase的试剂。GST-PAK1-PBD融合蛋白用于与GTP-bound cdc42的激活状态结合，随后可以被谷胱甘肽树脂免疫沉淀。Cdc42的激活水平随后使用一个cdc42 Mouse mAb通过western blot实验检测。
Background
小GTP-结合蛋白（G蛋白）Ras超家族包括了一大类蛋白（超过150个成员），基于其序列和功能相似性，可以被分为至少5组：Ras, Rho, Rab, Arf, 和 Ran (1-3).这些小G蛋白拥有GDP/GTP-结合和GTPase功能，能够在多种细胞和发育过程中发挥双向调控作用，包括细胞周期演进，细胞生存，细胞骨架重构，细胞极化和运动，囊泡和细胞核转运（1）。上游信号刺激GDP从GDP-结合形式（失活）解离，随后导致GTP结合形成GTP-结合形式（激活）。激活的G蛋白的下游效应结合区域经过构象变化，导致下游效应分子的结合和调控。这个激活状态能被GTPase关闭，它会水解GTP为GDP释放下游效应分子。这些Ras超家族蛋白固有的鸟苷酸交换和GTP水解活性也被鸟苷酸交换因子（GEFs）调节，GEFs会促进激活的GTP-结合形式和GTPase激活蛋白（GAPs）的形成，而GAPs会使GTPase变为GDP-结合失活形式（4）。
Rac和Cdc42是Rho-GTPase家族的成员。在哺乳动物中，Rac有3种亚型，Rac1，Rac2，Rac3，它们的序列高度相似。Rac1和Cdc42，作为该家族中研究的*多的蛋白，表达非常广泛。Rac2表达在造血来源的细胞中，Rac3在大脑中高表达，也在其他多种组织中有表达。Rac和Cdc42蛋白在细胞骨架重构，细胞膜转运，转录调控，细胞生长和发育过程中都发挥了重要作用（5）。结合GTP后会激活Rac/Cdc42活性，GTP通过蛋白的GTPase功能水解为GDP，*终导致失活。GTP水解由GTPase激活蛋白（GAPs）协助，而GDP更换为GTP则通过鸟苷酸交换因子（GEFs）进行。RhoGDI，一个鸟苷酸解离抑制因子，会在另一个水平通过调节RhoGDI的结合来进行，鸟苷酸解离抑制因子会保留Rho家族GTPases处于失活的GDP结合状态，包括Rac和Cdc42（6,7）。
1 Takai, Y. et al. (2001) Physiol Rev81, 153-208.
2 Colicelli, J. (2004) Sci STKE2004, RE13.
3 Wennerberg, K. et al. (2005) J Cell Sci118, 843-6.
4 Vigil, D. et al. (2010) Nat Rev Cancer10, 842-57.
5 Wennerberg, K. and Der, C.J. (2004) J Cell Sci117, 1301-12.
6 Bernards, A. and Settleman, J. (2004) Trends Cell Biol14, 377-85.
7 Rossman, K.L. et al. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol6, 167-80.
常见问题及解答
如何选择抗体
Ø我看到很多抗体都加了一个XP®，XP® 是什么意思？
Ø有些抗体名称里有个括号，括号里面是什么意思？
Ø我怎么知道有没有我需要的蛋白？
实验疑难问题解答
ØWB封闭用牛奶好还是BSA好？二抗稀释液用什么？
Ø做磷酸化抗体的时候一定要用脱脂奶粉稀释吗？
Ø我的抗体的浓度是多少？
在组织样本中如何操作
Ø我用的是组织样本，该如何破碎？
ØCST 的抗体是否适用于全组织样本裂解物？
抗体芯片
Ø抗体芯片的保质期是多久？有多个孔，我一次用不了那么多，该如何保存？
细胞因子
Ø人细胞因子适用于老鼠吗？
Ø应该怎样配制PH3.0，20 mM的柠檬酸？
Ø在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白？
siRNA
ØsiRNA有两个或多个的情况，该如何选择？哪个效果好？
ELISA标准品
ØELISA 有标准品吗？我如果买了其他公司的标准品，可不可以配套使用？
定制抗体
Ø需要更进一步的帮助吗？
Ø我能够订购一个定制配方的抗体吗？
ØCST能够定制我的抗体吗？
储存运输及发表文章
ØCST如何确保抗体的质量？
Ø我该如何储存我的抗体？多高的温度会影响抗体的稳定性？
Ø我需要发表文章，需要知道你们的产地，该如何写?
公司介绍
CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业，在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究，尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司，CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体，并在多种应用中进行严格的验证。同时，正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持，帮助他们设计实验，解决问题以获得*可靠的结果。我们之所以这样做，是因为如果我们做实验，我们也想要得到同样的服务。事实上，CST的确是这样的。
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