Cell Signaling(CST) 8820 Active Rho Detection Kit
产品编号 8820 | Cell Signaling(CST)
Cell Signaling Technology公司的细胞分析试剂盒提供了从头至尾的试剂和可行的操作步骤，从而在*少的时间内得到*精确的结果。这些充分验证的全套试剂盒可用于评估细胞生存、增殖、生存能力以及酶和激酶活性。
产品描述
Kit Includes | Quantity | Applications | Reactivity | Homology† | MW (kDa) | Isotype |
|---|
GTP γS | 50 µl | | | | | |
GDP | 50 µl | | | | | |
Glutathione Resin | 3 ml | | | | | |
Lysis/Binding/Wash Buffer | 100 ml | | | | | |
SDS Sample Buffer | 1.5 ml | | | | | |
Spin Cup and Collection Tubes | 30 ea | | | | | |
Rho Rabbit Antibody | 75 µl | | | | | |
GST-Rhotekin-RBD | 4 mg | | | | | |
Specificity / Sensitivity
Active Rho Detection Kit detects endogenous levels of GTP-bound (active) Rho as shown in Figure 1. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species.如图1，Active Rho Detection试剂盒可以检测内源性的GTP-bound (active) Rho。通过内部测试，该试剂盒能够检测来自指定物种的蛋白，但也可能会检测到其他物种中的同源蛋白。
Description
The Active Rho Detection Kit provides all reagents necessary for measuring activation of Rho GTPase in the cell. GST-Rhotekin-RBD fusion protein is used to bind the activated form of GTP-bound Rho, which can then be immunoprecipitated with glutathione resin. Rho activation levels are then determined by western blot using a Rho Rabbit Antibody.Active Rho Detection试剂盒提供了所有足以检测细胞中激活状态Rho GTPase的试剂。GST-Rhotekin-RBD融合蛋白用于与GTP-bound Rho的激活状态结合，随后可以被谷胱甘肽树脂免疫沉淀。Rho的激活水平随后使用一个Rho Rabbit 抗体通过western blot实验检测。
Background
小GTP-结合蛋白（G蛋白）Ras超家族包括了一大类蛋白（超过150个成员），基于其序列和功能相似性，可以被分为至少5组：Ras, Rho, Rab, Arf, 和 Ran (1-3).这些小G蛋白拥有GDP/GTP-结合和GTPase功能，能够在多种细胞和发育过程中发挥双向调控作用，包括细胞周期演进，细胞生存，细胞骨架重构，细胞极化和运动，囊泡和细胞核转运（1）。上游信号刺激GDP从GDP-结合形式（失活）解离，随后导致GTP结合形成GTP-结合形式（激活）。激活的G蛋白的下游效应结合区域经过构象变化，导致下游效应分子的结合和调控。这个激活状态能被GTPase关闭，它会水解GTP为GDP释放下游效应分子。这些Ras超家族蛋白固有的鸟苷酸交换和GTP水解活性也被鸟苷酸交换因子（GEFs）调节，GEFs会促进激活的GTP-结合形式和GTPase激活蛋白（GAPs）的形成，而GAPs会使GTPase变为GDP-结合失活形式（4）。
Rho家族小GTPases，包括Rho, Rac, 和cdc42,作为小分子转换器，调节了包括细胞迁移，黏附，增殖和分化等过程。他们能被鸟苷酸交换因子（GEFs）激活，GEFs随后催化结合的GDP转换为GTP；他们也能被GTPase激活蛋白（GAPs）抑制，GAPs可以催化GTP水解为GDP。第三个层次的调控是通过Rho GDP解离抑制子(RhoGDI)的化学结合进行的（5）。RhoA, RhoB 和RhoC，高度同源，但是似乎具有不同的生物学功能。羧基端修饰和亚细胞定位的不同会使这三个蛋白作为不同的信号分子发生反应（6,7）。
1 Takai, Y. et al. (2001) Physiol Rev81, 153-208.
2 Colicelli, J. (2004) Sci STKE2004, RE13.
3 Wennerberg, K. et al. (2005) J Cell Sci118, 843-6.
4 Vigil, D. et al. (2010) Nat Rev Cancer10, 842-57.
5 DerMardirossian, C. and Bokoch, G.M. (2005) Trends Cell Biol15, 356-63.
6 Wennerberg, K. and Der, C.J. (2004) J Cell Sci117, 1301-12.
7 Wheeler, A.P. and Ridley, A.J. (2004) Exp Cell Res301, 43-9.
常见问题及解答
如何选择抗体
Ø我看到很多抗体都加了一个XP®，XP® 是什么意思？
Ø有些抗体名称里有个括号，括号里面是什么意思？
Ø我怎么知道有没有我需要的蛋白？
实验疑难问题解答
ØWB封闭用牛奶好还是BSA好？二抗稀释液用什么？
Ø做磷酸化抗体的时候一定要用脱脂奶粉稀释吗？
Ø我的抗体的浓度是多少？
在组织样本中如何操作
Ø我用的是组织样本，该如何破碎？
ØCST 的抗体是否适用于全组织样本裂解物？
抗体芯片
Ø抗体芯片的保质期是多久？有多个孔，我一次用不了那么多，该如何保存？
细胞因子
Ø人细胞因子适用于老鼠吗？
Ø应该怎样配制PH3.0，20 mM的柠檬酸？
Ø在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白？
siRNA
ØsiRNA有两个或多个的情况，该如何选择？哪个效果好？
ELISA标准品
ØELISA 有标准品吗？我如果买了其他公司的标准品，可不可以配套使用？
定制抗体
Ø需要更进一步的帮助吗？
Ø我能够订购一个定制配方的抗体吗？
ØCST能够定制我的抗体吗？
储存运输及发表文章
ØCST如何确保抗体的质量？
Ø我该如何储存我的抗体？多高的温度会影响抗体的稳定性？
Ø我需要发表文章，需要知道你们的产地，该如何写?
公司介绍
CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业，在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究，尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司，CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体，并在多种应用中进行严格的验证。同时，正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持，帮助他们设计实验，解决问题以获得*可靠的结果。我们之所以这样做，是因为如果我们做实验，我们也想要得到同样的服务。事实上，CST的确是这样的。
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